當(dāng)疫情再一次伺機(jī)而動(dòng)時(shí),要想快速的控制病毒的傳播,做核酸檢測(cè)就成了必經(jīng)之路,同時(shí)也備受各界關(guān)注。但影響核酸檢測(cè)結(jié)果的因素是多種多樣的,包括樣本采集部位、采集方式、儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程、核酸提取操作等等。其中,樣本的穩(wěn)定性是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如何能使病毒快速失活,又能保護(hù)病毒核酸不被降解,維持檢測(cè)穩(wěn)定性的病毒樣本保存液就成了重中之重。
第一步:打破外殼,消滅“戰(zhàn)斗力”
和其他RNA病毒一樣,新冠病毒的結(jié)果簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),是由蛋白質(zhì)外殼包裹著單鏈核酸——RNA構(gòu)成的。我們可以簡(jiǎn)單地將病毒的RNA視為發(fā)號(hào)施令的“大腦”,蛋白質(zhì)則是執(zhí)行命令的“四肢”。新冠病毒感染人體并發(fā)生繁殖活動(dòng),引發(fā)病癥,這個(gè)過(guò)程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白結(jié)構(gòu)完成。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)變性劑,能迅速溶解蛋白質(zhì),導(dǎo)致病毒結(jié)構(gòu)破碎。當(dāng)帶有新冠病毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病毒受裂解液作用,蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復(fù)原的。這時(shí)候,病毒就失去了作惡的“爪牙”,不再擁有對(duì)人的感染能力,從而**了樣本運(yùn)輸、處理過(guò)程中接觸者的安全。
第二步:抑制酶活,押送“身份證”
外殼裂解后,新冠病毒的RNA游離在保存液當(dāng)中。作為單鏈大分子,RNA的穩(wěn)定性不像雙鏈的DNA那樣巋然不動(dòng),在自然環(huán)境中隨處存在的RNA酶便是使RNA水解斷裂的罪魁禍?zhǔn)?。因此,通常認(rèn)為失去外殼保護(hù)的病毒RNA是脆弱、不穩(wěn)定的,需要低溫儲(chǔ)存才能保證它的完整性。
第三步:配合提取,確認(rèn)“真兇”
病毒RNA妥善地儲(chǔ)存在病毒樣本保存液中,在進(jìn)行檢測(cè)前,還需要最后一個(gè)步驟:將保存液中的RNA捕捉、濃縮,作為較終樣本加入實(shí)時(shí)熒光PCR體系中,上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。
德晟生產(chǎn)的病毒保存液除了滅活型病毒保存液外,還有非滅活型病毒保存液。它是同時(shí)保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時(shí)也有一定的感染性風(fēng)險(xiǎn)。采樣后長(zhǎng)時(shí)間保存需要保持嚴(yán)格低溫。不管是哪種病毒保存液,我們?cè)谑褂脮r(shí)都需要按照要求嚴(yán)格操作、存放或運(yùn)輸。
詞條
詞條說(shuō)明
生物緩沖劑有很多類型,常用的如Tris、Bicine、鹽緩沖液等,在選擇緩沖劑的時(shí)候通常主要考慮的就是緩沖液的pH緩沖范圍和是否對(duì)實(shí)驗(yàn)體系產(chǎn)生干擾,其離子強(qiáng)度雖然影響不大,但這一些特定實(shí)驗(yàn)中還是不容忽視的。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)同一種緩沖劑的離子強(qiáng)度不是固定的,與特定溫度壓強(qiáng)下的解離常數(shù)是定值不一樣,離子強(qiáng)度受緩沖液的濃度以及緩沖比的影響。比如Bicine緩沖劑,其離子強(qiáng)度受溶液中Bicine的濃度以及解離
一直以來(lái),病毒感染時(shí)常侵襲著人類的健康,也是目前傳染性疾病大流行的主要原因之一。所以病毒的研究,是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的一大熱點(diǎn)。現(xiàn)有技術(shù)中,病毒提取,病毒培養(yǎng),甚至病毒的檢測(cè)與鑒別方面的研究都有著長(zhǎng)足的進(jìn)步。但是,現(xiàn)有技術(shù)還存在比較多的技術(shù)問(wèn)題等待研究,例如,從樣本中提取出的病毒,大部分并不穩(wěn)定,需要借助一些輔助工具來(lái)維持病毒長(zhǎng)期的活性穩(wěn)定,這就對(duì)病毒樣本保存的技術(shù)效果提出較高的要求。隨著核酸檢測(cè)的需求
卡波姆作為—種高效的增稠劑、助懸劑和凝膠基質(zhì),已被廣泛地應(yīng)用于化妝品領(lǐng)域中,其中卡波姆900系列是丙烯酸與烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇的高分子共聚物。根據(jù)聚合物的相對(duì)分子量和交聯(lián)程度,卡波姆可分為多種不同的型號(hào)??ú?80為卡波姆系列產(chǎn)品之一。 有研究對(duì)卡波姆980流變學(xué)性質(zhì)及影響因素進(jìn)行初探,卡波姆980的流變學(xué)性質(zhì)受到中和堿類型、pH值、濃度、電解質(zhì)等多種因素的影響,不同的中和堿對(duì)卡波姆980
卡波姆是聚烷基蔗糖或聚烷基季戊四醇與丙烯酸交聯(lián)聚合物的共聚物,在很低的濃度(通常0.2-1.0%)下即能夠形成高粘度的凝膠,被廣泛地用于日化、醫(yī)藥等行業(yè)。但是它有非常多的型號(hào),甚至名稱相近,這些不同型號(hào)可不可以互相替換呢? 首先需要了解的是卡波姆不同型號(hào)的意義,主要是根據(jù)聚合時(shí)使用材料的不同以及聚合度的不同,所以就有了多種不同規(guī)格型號(hào)的卡波姆。市場(chǎng)上常用的有卡波姆980、卡波姆940、卡波姆U20
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